Комплексное исследование мокроты. Посев и идентификация микроорганизмов методом времяпролетной МАСС-спектрометрии (MALDI-TOF), определение чувствительности к основному спектру антибиотиков и микроскопия с окраской по Граму

Описание
Воспалительные заболевания органов дыхания занимают одно из лидирующих мест в структуре общей заболеваемости в нашей стране. Важная роль в защите бронхолегочной системы принадлежит мокроте. В ее состав могут входить микроорганизмы, способствующие развитию инфекционных заболеваний, переходящих в хронические формы.

При относительном постоянстве основных возбудителей бронхолегочной патологии, резистентность микроорганизмов к антибиотикам повышается. Поэтому возникает необходимость не только идентифицировать возбудителей, но и определять их чувствительность к лекарственным препаратам.

В состав данного комплекса включены следующие исследования:

микроскопия с окраской по Граму;
идентификация микроорганизмов методом времяпролетной МАСС-спектрометрии (MALDI-TOF);
посев с определением чувствительности микроорганизмов к основному спектру антибактериальных и противогрибковых препаратов.

Технология MALDI-ToF MS

Одним из наиболее активно развивающихся в последние годы направлений в лабораторной диагностике инфекционных заболеваний является технология MALDI-ToF MS (матричноактивированная лазерная десорбция/ионизация с времяпролетным разделением). В основе метода MALDI-ToF лежит процедура мягкой ионизации исследуемого материала, позволяющая в присутствии особого вещества, под воздействием лазера ионизировать биологические макромолекулы без их фрагментации и деструкции. Для исследования микроорганизмов MALDI-ToF MS впервые был применен достаточно давно, в середине 70-х годов ХХ века. Идентификация микроорганизмов с использованием MALDI-ToF MS осуществляется путем сравнения белкового спектра исследуемого штамма с базовой коллекцией спектров референсных микроорганизмов известных видов. На основании степени соответствия спектров определяется принадлежность исследуемого микроорганизма к определенному виду.

В данном комплексе проводят определение чувствительности возбудителей к основному спектру антибиотиков и антимикотиков. При получении чистой культуры спектр антибиотиков, к которым определяется чувствительность, зависит от вида выделенных микроорганизмов, которые подобраны с учетом особенностей микрофлоры верхних дыхательных путей. В случае отсутствия роста патогенных, условно-патогенных микроорганизмов или росте нормальной флоры, определение чувствительности к препаратам не проводится.